Субпопуляция лимфоцитов

Содержание

Исследование крови на иммунофенотипирование — один из наиболее точных методов диагностики. С помощью него обнаруживают и квалифицируют различные заболевания, подтверждают диагноз, также данный метод позволяет определить наиболее удачную схему лечения.

Все исследования проводятся высококвалифицированными сотрудниками ООО «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР» в Москве по приемлемой стоимости: профессором, доктором медицинских наук Луговской С. А., доцентом, кандидатом медицинских наук Почтарь М. Е., доцентом, кандидатом медицинских наук Наумовой Е. В.

Какой биоматерила используется для анализа ИФТ?

В зависимости от задач исследования, материалом для анализа может служить:

  • периферическая кровь (взятие анализа осуществляется в медицинском центре «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР»);
  • костный мозг (стернальная пункция выполняется врачом-гематологом стационара в пробирку с К2-ЭДТА);
  • ликвор (люмбальная пункция проводится врачом стационара, ликвор собирается в пробирку со стабилизатором Transfix);
  • выпотные жидкости (плевральная, асцитическая, перикардиальная — взятие материала проводится врачами стационаров).

Суть исследования заключается в том, что при его проведении определяются типы клеток крови. С помощью особого оборудования или люминесцентных микроскопов, легко распознать принадлежность каждой из этих клеток к тому или иному виду и выявить возможные поражения.

Как подготовиться к исследованию крови на иммунофенотипирование?

Забор биоматериала производится в утренние часы натощак. Перед проведением исследования, необходим период голодания, желательно, более 8 часов. Можно выпить небольшое количество воды. За несколько дней до процедуры недопустимо употребление алкоголя, курение сигарет, активные занятия спортом. На искажение результатов анализа ИФТ влияют тяжелые психоэмоциональные состояния.

Показания для проведения исследования

Как и любой анализ, иммунофенотипирование проводится по ряду причин. Основные из них:

  • Затяжной характер заболевания;
  • Острые воспалительные и вирусные поражения;
  • Подозрение на новообразования любого характера;
  • Анализ назначают перед проведением серьезных медицинских манипуляций;
  • Аллергические реакции;
  • При нарушении защитных функций организма;
  • Постоперационный период, сопровождающийся патологическими процессами;
  • Перед и после трансплантации внутренних органов;
  • Подозрение на наследственный или приобретенный иммунодефицит.

Обратите внимание, что интерпретировать результаты исследования крови на иммунофенотипирование нельзя самостоятельно и тем более, заниматься самолечением. Поставить точный диагноз может только врач-иммунолог, обращаясь также к другим результатам анализов и обследований. Нормы показателей отличаются в зависимости от пола и возраста пациента.

В нашем медицинском центре в Москве есть все необходимое для качественной диагностики — врачи с многолетним опытом, современное оборудование, дружелюбный сервис и разумная цена на услуги. С помощью анализа на ИФТ легко предотвратить страшную болезнь или обнаружить едва начавшиеся патологические процессы. Позаботьтесь о своем здоровье уже сегодня!

Заведующий лабораторией — Гальцева Ирина Владимировна (на фото справа).

Лаборатория была организована 1 марта 2013 г.

Иммунофенотипирование клеток, осуществляемое с помощью проточной цитофлуориметрии, широко применяется в клинико-диагностических и научных исследованиях. Отличительной чертой данного анализа является возможность определения фенотипа единичных клеток. Метод основан на применении моноклональных антител к антигенам дифференцировки, сочетание которых позволяет выявлять разнообразные клеточные популяции. Совокупность антигенов на поверхности клетки называется иммунофенотипом. Проточная цитофлуориметрия за последние 20 лет стала неотъемлемым исследованием в диагностике различных гематологических заболеваний, в частности лимфом, лейкозов, плазмоклеточных неопластических заболеваний, пароксизмальной ночной гемоглобинурии (ПНГ) и др. На основании данных об иммунофенотипе и анализе большого количества клеток проточная цитофлуориметрия позволяет находить крайне редко встречающиеся клеточные субпопуляции.

Коллектив лаборатории. Гальцева Ирина Владимировна (сидит) — заведующий лабораторией. Стоят: Капранов Н. М., Давыдова Ю. О.

Сотрудники лаборатории являются высококвалифицированными специалистами в области проточной цитофлуориметрии, прошли обучение не только в клинических центрах России, но и в зарубежных университетах и имеют сертификаты по основам проточной цитометрии. Прошли обучение в международной школе цитометрии в г. Женева (Швейцария) и получили сертификат, подтверждающий адекватность анализа и разрешающий проводить исследование ПНГ-клона (Россия, Америка). Также получили практический опыт работы по диагностике и анализу острых лейкозов и лимфом в Гентском университете в Бельгии. Сотрудники лаборатории регулярно посещают международные конференции и обмениваются знаниями с зарубежными и российскими коллегами.

Лаборатория тесно сотрудничает с научно-клиническими подразделениями НМИЦ гематологии. Основным направлением работы лаборатории является стандартизация и применение метода проточной цитофлуориметрии для диагностики минимальной остаточной болезни (МОБ) при таких заболеваниях, как множественная миелома, острые лимфобластные и миелобластные лейкозы.

В лаборатории осуществляют подсчёт гемопоэтических CD34-позитивных стволовых клеток на рутинной основе в образцах периферической крови, костного мозга и продуктах лейкоцитафереза согласно международному протоколу ISHAGE (International Society of Hematotherapy and Graft Engineering).

Врач КЛД Давыдова Юлия Олеговна.

Диагностика плазмоклеточных неоплазий и поиск МОБ при множественной миеломе проводится согласно последним мировым рекомендациям по стандартизации исследований, опубликованным в 2016 году (Stetler—Stevenson, Paiva, Rawstron). Мониторинг МОБ при острых В- и Т-линейных лимфобластных лейкозах проводится в рамках протоколов ОЛЛ-2009 и ОЛЛ-2016. Проводится оптимизация и отработка методики поиска МОБ при острых миелобластных лейкозах. Впервые в России в лаборатории начато применение и интеграция иммунофенотипического исследования в схему диагностики миелодиспластических синдромов. Данный анализ проводится в соответствии с европейскими рекомендациями сообщества LeukemiaNet.

Медицинский физик Капранов Николай Михайлович.

В лаборатории проводятся многочисленные исследования, которые ложатся в основу диссертационных работ врачей-гематологов и трансфузиологов. С участием сотрудников лаборатории опубликовано большое количество печатных работ и стендовые доклады на международных симпозиумах. В сферу научных интересов входят исследования субпопуляционого состава крови и костного мозга у больных после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, в частности Т-регуляторных клеток; изучение циркулирующих эндотелиальных клеток у больных после трансплантации; исследование экспрессии ангиотензин-превращающего фермента на мобилизованных стволовых клетках крови; изучение динамики ПНГ-клона у больных апластической анемией; проводится изучение элементов иммунологического синапса при лимфомах; фиксированных антитромбоцитарных антител у больных с множественными трансфузиями. На базе лаборатории проведено исследование активационных маркеров тромбоцитов в заготовленных при различных условиях тромбоконцентратах доноров, оценивается динамика изменения количества циркулирующих CD34+ клеток в периферической крови у пациентов после проведения спленэктомии, оцениваются различные свойства мультипотентных мезенхимных стромальных клеток, использующихся для профилактики реакции трансплантат против хозяина после трансплантации аллогенных стволовых клеток, оценивается динамика изменения субпопуляционного состава лимфоцитов крови у больных острыми В-лимфобластными лейкозами, получающих таргетную терапию и пациентов после выполнения трансплантации аллогенной почки.

Ключевые сотрудники

Давыдова Юлия Олеговна — врач клинической лабораторной диагностики.

Капранов Николай Михайлович — медицинский физик.

Одним из методов клинической диагностики является исследование крови способом иммунофенотипирования лимфоцитов. В его основе реакция между антителами и антигенами, которая используется для определения типов клеток крови, взятых из образцов биологического материала – крови, лимфатических узлов или костного мозга.

Анализ проводится с использованием специальных маркеров или меток, которые присоединяются к антигенам клеток. С помощью лабораторного оборудования отслеживают маркеры, производят подсчет клеток крови. Знание количества каждой из них позволяет квалифицировать опухолевые заболевания, подтвердить диагноз пациенту с определением конкретного его типа, например: достоверно установить вид лимфомы, лейкоза. Такая точная диагностика позволяет сделать выбор наиболее эффективной схемы лечения.

Метод исследования, условия, необходимые для проведения

Иммунофенотипирование – это исследование лимфоцитов, которое помогает увидеть клетки крови, распознать их принадлежность к определенному виду. Исследование проводят с использованием современного диагностического оборудования – цитофлюориметров или особых микроскопов, способных опознавать люминесцирующие составляющие, которые помогают различать разновидности люминесцирующих кровяных телец, вести точный их подсчет в каждой пробе. Оборудование позволяет опознать каждую из меток. Маркирование клеток это добавление в пробу антикоагулянта (реагент К2ЭДТА).

Забор образца для анализа производится из вены в области локтевого сустава. Для точного результата пациент должен соблюсти условия – проба берется натощак в утреннее время. В некоторых случаях допускается легкий прием пищи за 4 часа до процедуры, пациенту можно выпить небольшое количество обычной воды. Занятия спортом накануне диагностики или прием алкоголя запрещен, нарушение запрета приводит к искаженным результатам анализа. Повышенная психоэмоциональная нагрузка недопустима.

Для взятия крови специалист использует вакуумную пробирку. Ее применение позволяет достичь точного результата исследования, снизить болевые ощущения, точно произвести соотношение биологического материала и реагента.

После того, как образец поместили в пробирку, лаборант перемещает взятую пробу с антикоагулянтом, для этого требуется 10 раз медленно перевернуть емкость.

Для хранения и транспортировки материала для анализа требуется соблюдение условий: температурного режима при хранении образца от 18 до 23°С, сохранения положения пробирки вертикально. Срок ожидания результатов не превышает 24 часов от взятия пробы. Время проведения исследования 4 часа.

Количественный состав каких клеток отражает результат анализа?

В ходе проведения исследования специалисты клинической лаборатории отслеживают показатели в периферической крови пациента, возможные поражения. На бланк анализа заносят показатели:

  1. Абсолютное количество лимфоцитов, имеющих здоровое округлое ядро без патологий.
  2. Содержание Т-клеточных лимфоцитов – ядро этого вида кровяных телец образуется и созревает в тимусе или вилочковой железе. Обеспечивает иммунную реакцию организма в определенных условиях, осуществляет контроль над гуморальным ответом организма работой В-лимфоцитов, которые образовывают антитела. Обозначают ядро Т-клеточного лимфоцита как CD3+.
  3. Количественное значение Т-хеплеров (ядро обозначается CD3+CD4+) – разновидности Т-лимфоцитов, оптимальное количество которых в крови способствуют усилению иммунного ответа организма на поражение чужеродным антигеном, их 2 типа. Т-клеточный хелпер первого типа является «защитником» от опухолевых новообразований, вирусных агентов, участвует в защитных воспалительных реакциях. Второй Т-клеточный тип обеспечивает взаимосвязь с гуморальным иммунитетом, участвует в выработке иммуноглобулина Е – веществе, воздействующим на агрессивные аллергены внешней среды, смягчает поражение ими.
  4. Количество Т-цитотоксических лимфоцитов, ядро которых принято обозначать как CD3+CD8+. Такие лимфоциты распознают поражение клеток собственного организма и проводят их лизис или растворение. Таким способом организм борется с опухолевыми тканями, с поражением бактериями, которые паразитируют на клеточном уровне. Ядро Т-цитотоксического лимфоцита важный компонент иммунитета, направленного на уничтожение вирусов.
  5. В-лимфоциты, обозначаемые символами СD19+, вырабатывают активные вещества (антитела), действие которых направлено на поддержание гуморального иммунитета.
  6. Количество ЕК-клеток, их ядро обозначается как CD3-CD16+CD56+. Их называют естественными, или натуральными, киллерами. Такое название определяет их неиммунная цитологическая активность, которая направлена на клетки-мишени, имеющие неопластические изменения.
  7. Т-ЕК (ЕКТ) клетки, ядро которых имеет естественную киллерную активность, защищают от поражения клеток, имеющих качества и признаки Т-лимфоцитов.
  8. Иммунорегуляторный индекс, который показывает соотношение Т-хелперов и Т-цитотоксических клеток в крови, обозначается в анализе в виде соотношения CD3+CD4+/CD3+CD8+.

Когда назначают исследование?

Фенотипирование видов лимфоцитов назначают для диагностики ряда заболеваний. Иммунологи назначают исследование, если имеются основания заподозрить одни из них или при наличии «ярких» признаков других. Например: расшифровка количества лимфоцитов с определенным фенотипом понадобится при:

  • инфекционных заболеваниях, поражении хронического характера или если болезнь имеет затяжной характер,
  • аллергических реакциях организма,
  • проявлении устойчивых признаков и симптомов, указывающих на иммунодефицит врожденного или приобретенного свойства,
  • подозрении на опухолевые образования доброкачественной или злокачественной природы,
  • заболеваниях аутоиммунного типа, спровоцированных расстройством защитной системы, поражением собственного организма,

Диагностика периферической крови требуется в других случаях. Ее назначат перед серьезным оперативным вмешательством, которое требуется больному в плановом порядке. При иммунофенотипировании врач узнает все процессы иммунного характера, происходящие у конкретного больного, что позволяет скорректировать защитные процессы, избежать клеточного поражения, и нормализовать их работу. Большое значение для врача имеют показатели различных видов кровяных телец, Т-клеточный состав крови в послеоперационный период, особенно в случаях с развитием патологических процессов.

Метод применяют и для оценки состояния человека, которому требуется трансплантация органов или проведена операция – анализ на иммунофенотипирование проведут на подготовительном этапе и во время послеоперационного восстановления, чтобы предупредить поражение и отторжение органа. Направление на анализ получают пациенты, лимфоциты которых могут изменить качественный и количественный состав из-за лечения заболеваний медикаментами определенных групп – иммуномодуляторами, иммунодепрессантами или цитостатиками.

Нормы и референсные значения содержания в крови частиц определенного вида зависят от возраста пациента. Врачи для оценки показателей используют специальные таблицы, в которых указаны оптимальные значения, пределы отклонений.

Какие проблемы отражают повышенные и пониженные Т-клеточные лимфоциты

Результат анализа покажет отклонение от нормы по количеству Т-клеточных лимфоцитов. Повышение их количества свидетельствует об иммунном воспалении, поражении или гиперактивности защитных процессов пациента. Такое превышение нормы вызывают заболевания – лимфолейкоз (острая и хроническая стадии), ряд вирусных и бактериальных инфекций в начале развития болезни. Увеличение Т-лимфоцитов возможно при изменении характера заболевания, переход его в хроническую форму.

Если у обследуемого абсолютное число Т-клеточных лимфоцитов снижено, говорят о развитии иммунологического паралича. Он сопровождает воспалительный процессы, может указывать на развитие злокачественных опухолевых новообразований. Такой показатель выявляется, если больная сердечная мышца – миокард, при некоторых сложных травмах, его снижение вызывает курение.

Колебание числа В-лимфоцитов

Увеличение числа В-лимфоцитов сигнализирует о поражении организма воспалительным процессом, развивающимся в острой или хронической стадии. Его природа аллергического, аутоиммунного или инфекционного характера. Эти лимфоциты увеличиваются из-за В-лимфолейкоза, бронхиальной астмы, муковисцидоза, больной печени и при хронических патологиях. Увеличенные показатели по В-лимфоцитам в анализе отражают восстановление после инфекций, перенесенных в острой и тяжелой форме.

Если число В-лимфоцитов не соответствует нижним пределам нормы, при проведении дополнительной диагностики врач подтвердит пациенту развитие опухолевых новообразований, острые вирусные инфекции или инфекции бактериального типа, развитие очагов воспаления в организме больного.

Отклонения показателей естественных киллеров

Повышенному уровню естественных киллеров способствуют патологические процессы, связанные с:

  • запуском онкологических процессов,
  • тяжелым течением воспалительного процесса, воспалительные заболевания в хронической стадии,
  • с избыточной выработкой антигенов, борющихся с бактериальным или вирусным процессом.

Содержание в клетках крови естественных киллеров может быть снижено из-за повышения уровня в крови Т-лимфоцитов и связано с процессами, вызывающими такое повышение.

Показатели Т-цитотоксических лимфоцитов

Если значение показателя CD8+ в превышающих норму цифрах, закономерно заподозрить опухолевое заболевание, вирусный процесс в активной стадии (при развитии вирусной, грибковой или внутриклеточной инфекции, заболеваний подобного типа).

Сниженные значения Т-цитотоксических лимфоцитов в результатах анализа предупреждают о процессах, развивающихся на фоне аутоиммунных болезней. Такой процесс подтверждает атаку аллергенов, развитие аллергии на момент обследования.

Какие процессы определяются по уровню Т-хелперов

Повышение содержание Т-хеплеров свидетельствует об остром воспалительном процессе в активной стадии. Иммунное воспаление отражает увеличение Т-хеплеров первого типа, рост показателя по второму типу определяет наличие воспалительного процесса аллергической природы. Обострение аутоиммунной патологии определяется, если Т-хеплеры обоих типов увеличены.

Снижение Т-хелперов происходит из-за состояния иммунологического паралича, выявляет иммунодефицит вторичного типа у больного.

Отклонения значений по уровню Т-ЕК клеток

Количество Т-ЕК клеток повышается, увеличиваясь по отношению к референсным значениям их содержания в крови по причине:

  • наличия хронических воспалительных процессов с длительным периодом воздействия на иммунную систему,
  • воспалительных процессов, сопровождаемых тяжелым протеканием, осложнениями при лечении,
  • сохранение инфекции в активном состоянии в клетках организма на протяжении значительного периода времени.

Сниженные лимфоциты такого вида не отображают значимые процессы, не являются важными для диагностики.

Использование метода иммунофенотипирования лимфоцитов позволяет проводить диагностику патологий, заподозрить развитие опасных, опухолевых болезней. Метод является безопасным для обследуемого, не требует значительных финансовых затрат.


>Субпопуляции лимфоцитов крови>Диагностическое направление

Оценка состояния иммуной системы

Общая характеристика

Данное исследование позволяет охарактеризовать лимфоцитарное звено клеточного иммунитета: процентное соотношение основных субпопуляций, их абсолютное количество в крови, а также уровень активации. CD3+ — основной маркер Т-лимфоцитов. Т-клетками называют большую группу лимфоцитов, окончательная дифференциация которых проходит в тимусе. Они принимают участие в противовирусном иммунном ответе, аллергических реакциях замедленного типа, реакциях отторжения трансплантата, обеспечивают противоопухолевый иммунитет. Т-клетки могут быть как исполнительными клетками иммунитета (т.н. эффекторами, к ним относят цитотоксические лимфоциты, CD8+) так и регулировщиками иммунного ответа (хелперные лимфоциты, CD4+). CD3+CD16/56+ — цитолитические Т-лимфоциты. На поверхности данных клеток присутствуют маркеры, свойственные как Т-лимфоцитам, так и NK-клеткам, поэтому данную субпопуляцию называют ТNK- лимфоцитами. Они проявляют уникальный спектр свойств: способность к цитолизу (разрушению) вирус-инфицированных и онкогенных клеток с одной стороны, и цитокин-продуцирующую активность с другой. HLA-DR+ — маркер поздней и длительной активации клеток. Позитивные по HLA-DR лимфоциты длительно циркулируют в крови, а экспрессия этого маркера наиболее полно отражает активационное состояние клеток. CD3+CD4+ — Т-хелперы принимают участие в индукции специфического иммунного ответа. Одной из важных их функций является выработка цитокинов, которые влияют на все звенья воспалительного процесса, и могут направлять иммунный ответ на преимущественно гуморальный или цитотоксический путь и регулировать его интенсивность. CD3+CD8+ — цитотоксические Т-лимфоциты. Их функция состоит в уничтожении собственных клеток, зараженных вирусами, опухолевых клеток и др. RCD3+CD4+/CD3+CD8+ индекс представляет собой соотношение субпопуляций Т-хелперов и Т-цитотоксических лимфоцитов. На разных этапах воспалительного процесса их количество в крови меняется, но в норме соотношение не опускается ниже единицы и не поднимается выше 2,5. Однако, при тяжелых воспалительных, септических процессах, на фоне иммунодефицитов (включая СПИД) и некоторых аутоиммунных заболеваний данный показатель значительно отклоняется от нормального диапазона. CD3+CD4+CD8+ – т.н.»двойные позитивы». В норме клетки с подобным фенотипом в кровотоке присутствуют в незначительном количестве. Они представляют собой высокодифференцированные клетки памяти, либо те клетки, которые не прошли отрицательную селекцию в тимусе. CD3+CD4-CD8 — т.н.»двойные негативы» — незрелые Т-лимфоциты, которые не экспрессируют ни маркер Т-хелперов, ни маркер Т-цитотоксических клеток. Доля таких клеток среди прочих Т-лимфоцитов несколько возрастает во время активного выхода лимфоцитов из органов кроветворения, либо при нарушениях функции тимуса.Часто львиная доля даблнегативных Т-клеток является гамма/дельта-Е-клетками. CD19+ — основной маркер В-лимфоцитов. Данные клетки являются важнейшим звеном гуморального иммунного ответа. CD56/CD16+ NK-клетки (натуральные киллеры) представляют собой особую популяцию больших гранулярных лимфоцитов. Эти клетки способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными агентами, мутировавшие опухолевые клетки, а также любые другие клетки аллогенного или ксеногенного происхождения.

Показания для назначения

1. Рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением.
2. Подозрение на генетически обусловленный или приобретённый иммунодефицит.
3. Аутоиммунные заболевания.
4. Аллергические заболевания.
5. Контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами.

>Маркер

Маркер выявления первичного или вторичного иммунодефицита и контроль проведения иммуностимулирующей терапии.

Клиническая значимость

Определение содержания основных субпопуляций лимфоцитов имеет диагностическое значение при первичных и вторичных иммунодефицитных, лимфопролиферативных заболеваниях и ВИЧ-инфекции. Содержание активированных Т-лимфоцитов может повышаться при иммунной активации, вызванной инфекцией или отторжением трансплантата. Идентификация субпопуляций может также применяться для оценки тяжести, длительности лечения и прогноза исхода заболевания, оценки эффективности проводимого лечения.
Лечащий врач должен больше обращать внимание на соответствие характера отклонения показателя, значимого при той или иной патологии, клинической картине заболевания.
Иными словами, фенотипирование лимфоцитов используется для подтверждения или опровержения диагноза, а также для мониторинга состояния иммунной системы пациента в процессе лечения.

Состав показателей:

% активированных Т-лимфоцитов (CD3+HLA-DR+)

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 0 — 6 3 М — 12 М 0 — 8 12 М — 3 Л 1 — 8 3 Л — 6 Л 1 — 8 6 Л — 16 Л 2 — 9 16 Л — 120 Л 3 — 10

% активированных Т-хелперов (CD3+CD4+HLA-DR+)

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 0 — 4 3 М — 12 М 0 — 5 12 М — 3 Л 1 — 7 3 Л — 16 Л 1 — 8 16 Л — 120 Л 2 — 9

% активированных Т-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+HLA-DR+)

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 0 — 10 3 М — 12 М 0 — 10 12 М — 6 Л 1 — 12 6 Л — 16 Л 2 — 14 16 Л — 120 Л 3 — 19

% цитолитических Т-лимфоцитов (CD3+CD16/56+)

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 0 — 3 3 М — 12 М 0 — 7 12 М — 3 Л 0 — 7 3 Л — 6 Л 0 — 10 6 Л — 120 Л 0 — 10

B-лимфоциты (CD19+)

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 12 М 17 — 32 12 М — 3 Л 19 — 31 3 Л — 6 Л 16 — 28 6 Л — 16 Л 12 — 22 16 Л — 120 Л 7 — 19 Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 12 М 0,5 — 2,2 12 М — 3 Л 0,4 — 1,6 3 Л — 6 Л 0,5 — 1,1 6 Л — 16 Л 0,3 — 0,9 16 Л — 120 Л 0,1 — 0,4

CD3+CD4+CD8+

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 120 Л

CD3+CD4-CD8-

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 12 М 12 М — 3 Л 3 Л — 5 Л 5 Л — 16 Л 16 Л — 120 Л

NK-клетки (CD3-СD16/56+)

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 2 — 14 3 М — 12 М 4 — 16 12 М — 3 Л 5 — 18 3 Л — 6 Л 6 — 20 6 Л — 16 Л 6 — 20 16 Л — 120 Л 6 — 20 Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 0,05 — 0,7 3 М — 12 М 0,1 — 0,9 12 М — 3 Л 0,07 — 1,3 3 Л — 6 Л 0,1 — 0,9 6 Л — 16 Л 0,1 — 0,8 16 Л — 120 Л 0,1 — 0,4

T-лимфоциты (CD3+)

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 55 — 80 3 М — 12 М 50 — 76 12 М — 3 Л 54 — 80 3 Л — 6 Л 59 — 78 6 Л — 16 Л 59 — 76 16 Л — 120 Л 60 — 80 Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 2,0 — 6,5 3 М — 12 М 1,8 — 6,5 12 М — 3 Л 1,5 — 5,4 3 Л — 6 Л 1,4 — 3,8 6 Л — 16 Л 1,1 — 2,6 16 Л — 120 Л 0,8 — 2,2

T-хелперы (CD3+CD4+)

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 38 — 60 3 М — 12 М 35 — 57 12 М — 3 Л 31 — 49 3 Л — 6 Л 32 — 45 6 Л — 16 Л 30 — 44 16 Л — 120 Л 33 — 52 Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 1,4 — 5,0 3 М — 12 М 1,2 — 4,6 12 М — 3 Л 1,0 — 3,6 3 Л — 6 Л 0,7 — 2,8 6 Л — 16 Л 0,6 — 1,4 16 Л — 120 Л 0,5 — 1,4

T-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+)

Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: %

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 15 — 35 3 М — 12 М 16 — 34 12 М — 3 Л 16 — 38 3 Л — 6 Л 21 — 35 6 Л — 16 Л 25 — 35 16 Л — 120 Л 19 — 35 Метод: Проточная цитометрия
Единица измерения: Миллиардов на литр

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 0,6 — 2,2 3 М — 12 М 0,7 — 2,4 12 М — 3 Л 0,8 — 2,0 3 Л — 6 Л 0,5 — 1,8 6 Л — 16 Л 0,4 — 1,2 16 Л — 120 Л 0,3 — 0,9

Соотношение CD3+CD4+ / CD3+CD8+

Метод: Проточная цитометрия

Референтные значения:

Возраст М Ж Комментарии 0 Д — 3 М 1,3 — 3,2 3 М — 12 М 1,1 — 3,0 12 М — 16 Л 1,0 — 2,5 16 Л — 120 Л 1,0 — 2,5

Выполнение возможно на биоматериалах:

Биологический материал Условия доставки Контейнер Объем Цельная кровь Условия доставки: 24 Час. при температуре от 20 до 25 градусов Цельсия Контейнер: Вакутейнер с натрий-гепарином Объем: 4 Миллилитров

Правила подготовки пациента

Стандартные условия: Период голодания 8 часов (если другое
не определено врачом). Можно пить
воду. Биоматериал принимается в
соответствии с графиком взятия биоматериала в отделении МЛ ДІЛА.
Накануне исследования необходимо исключить физические нагрузки (спортивные тренировки) и курение. Детям до 5 лет и взрослым с противопоказаниями по голоданию, допускается легкий прием нежирной пищи хотя бы за 2 часа до сдачи БМ

Какова норма лимфоцитов в крови? Есть ли разница в их количестве у мужчин и женщин, детей и взрослых? Сейчас все расскажем. Уровень лимфоцитов в крови определяется в ходе общеклинических анализов с целью первичной диагностики наличия инфекционных заболеваний, аллергических реакций, а также при необходимости оценки побочных эффектов от лекарств и эффективности выбранного лечения.

Определение величины активированных лимфоцитов не является рутинным лабораторным исследованием и проводится исключительно при наличии показаний.

Данный анализ не выполняется отдельно от общего иммунологического обследования пациента или определения других лейкоцитарных клеток (эозинофилов, моноцитов, лимфоцитов в крови и т.д.) поскольку изолировано не имеет диагностической ценности.

Что такое лимфоциты в анализе крови?

Лимфоциты lymph – это белые кровяные клетки (разновидность лейкоцитов), посредствам которых реализуется защитная функция организма человека от чужеродных инфекционных агентов и собственных мутантных клеток.

Лимфоциты абс – это абсолютное число данного вида клеток, определяемое по формуле:

Общее количество лейкоцитов * Содержание лимфоцитов (%)/100

Активированные лимфоциты подразделяются на 3 субпопуляции:

  • Т-лимфоциты – созревают в тимусе, ответственны за реализацию клеточного типа иммунного ответа (непосредственное взаимодействие иммунных клеток с патогенами). Они подразделяются на Т-хелперы (принимают участие в антигенпрезентации клеток, степени выраженности иммунной реакции и в синтезе цитокинов) и цитотоксические Т-лимфоциты (распознают чужеродные антигены и уничтожают их за счёт выброса токсинов или внедрения перфоринов, которые повреждают целостность цитоплазматической мембраны);
  • В-лимфоциты — обеспечивают гуморальный иммунитет посредством выработки специфических белковых молекул – антител;
  • NK-лимфоциты (натуральные киллеры) – растворяют клетки, зараженные вирусами или подвергшиеся злокачественному перерождению.

Известно, что лимфоциты в крови способны синтезировать на своей поверхности ряд антигенов, при этом, каждый из них уникален для своей субпопуляции и этапа формирования клетки. Функциональная активность подобных клеток различна. В большинстве случаев они являются мишенью для других лейкоцитов на этапе иммунофенотипирования.

Кластер дифференциации и его типы

Кластер дифференциации (cluster designation) – искусственно созданная номенклатура с присвоением номера различных антигенов, которые вырабатываются на поверхности лимфоцитов в крови. Синонимы термина: CD, CD-антиген или CD-маркер.

Во время лабораторной диагностики наличие меченых клеток в общей субпопуляции белых кровяных телец определяется при помощи моноклональных (одинаковых) антител с метками (на основе флюорохрома). При взаимодействии антител со строго специфичными CD-антигенами образуется устойчивый комплекс «антиген-антитело», при этом можно произвести подсчёт оставшихся свободными антител с меткой и определить количество лимфоцитов в крови.

Выделяют 6 типов кластеров CD-антигенов:

  • 3 – характерен для Т-лимфоцитов, принимает участие в образовании комплекса передачи сигнала по мембране;
  • 4 – идентифицируется на нескольких типах лейкоцитов, способствует облегчению процесса распознавания чужеродных антигенов при взаимодействии с MHC (главный комплекс гистосовестимости) 2 класса;
  • 8 – представлен на поверхности цитотоксичных Т-, NK-клеток, функционал аналогичен предыдущему типу кластеров, только распознаются антигены связанные с MHC 1 класса;
  • 16 – присутствует на различных видах белых кровяных телец, входит в состав рецепторов, отвечающих за активацию фагоцитоза и цитотоксичного ответа;
  • 19 – компонент В-лимфоцитов, необходим для их правильной дифференциации и активации;
  • 56 – вырабатывается на поверхности NK- и некоторых Т-клеток, необходим для обеспечения их прикрепления к тканям, поражённых злокачественными опухолями.

Показания к исследованию

Активированные лимфоциты в крови у ребёнка и взрослых определяются при:

  • диагностике аутоиммунных заболеваний, онкопатологий, аллергических реакций и степени их выраженности;
  • диагностике и контроле лечения острых инфекционных патологий;
  • проведении дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных инфекций;
  • оценке состояния иммунной системы (в том числе и при наличии иммунодефицитов);
  • оценке напряжённости иммунного ответа в случае наличия тяжёлых инфекций, ставших хроническими;
  • комплексном обследовании до и после обширного хирургического вмешательства;
  • подозрении на угнетение иммунного статуса, вызванного генетической мутацией;
  • контроле степени напряжённости иммунитета на фоне приёма иммунодепрессанов или иммуностимуляторов.

Норма лимфоцитов в крови

Количество лимфоцитов в крови определяется при помощи проточной цитофлуориметрии, сроки исследования 2-3 суток без учёта дня взятия биоматериала. Важно грамотно интерпретировать полученные результаты, желательно приложение к иммунограмме заключения врача-иммунолога. Окончательный диагноз устанавливается по совокупности данных лабораторных и инструментальных методов обследования, а также клинической картины пациента.

Отмечено, что диагностическая ценность значительно возрастает при оценке напряжённости иммунитета у человека в динамике при регулярных повторных анализах.

Активированные лимфоциты в анализе крови у ребенка и взрослого отличаются, поэтому при расшифровке результатов следует подбирать нормальные (референсные) значения с учётом возраста пациента.

Таблица нормального диапазона лимфоцитов по возрасту

В таблице представлены величины допустимых норм лимфоцитов (отдельных субпопуляций) в крови у детей и взрослых.

Возраст Доля от общего числа лимфоцитов, % Абсолютное количество клеток, *106/л
CD 3 + (Т-лимфоциты)
До 3 месяцев 50 – 75 2065 – 6530
До 1 года 40 – 80 2275 – 6455
1 – 2 года 52 – 83 1455 – 5435
2 – 5 лет 61 – 82 1600 – 4220
5 – 15 лет 64 – 77 1410 – 2020
Старше 15 лет 63 – 88 875 – 2410
CD3+CD4+ (Т-хелперы)
До 3 месяцев 38 – 61 1450 – 5110
До 1 года 35 – 60 1695 – 4620
1 – 2 года 30 – 57 1010 – 3630
2 – 5 лет 33 – 53 910- 2850
5 – 15 лет 34 – 40 720 – 1110
Старше 15 лет 30 – 62 540 – 1450
CD3+CD8+ (Т-цитотоксические лимфоциты)
До 3 месяцев 17 – 36 660 – 2460
До 1 года 16 – 31 710 – 2400
1 – 2 года 16 – 39 555 – 2240
2 – 5 лет 23 – 37 620 – 1900
5 – 15 лет 26 – 34 610 – 930
Старше 15 лет 14 – 38 230 – 1230
CD19+ (В-лимфоциты)
До 2 лет 17 – 29 490 — 1510
2 – 5 лет 20 – 30 720 – 1310
5 – 15 лет 10 – 23 290 – 455
Старше 15 лет 5 – 17 100 – 475
CD3-CD16+CD56+ (NK-клетки)
До 1 года 2 – 15 40 – 910
1 – 2 года 4 – 18 40 – 915
2 – 5 лет 4 – 23 95 – 1325
5 – 15 лет 4 – 25 95 – 1330
Старше 15 лет 4 – 27 75 – 450
Старше 15 лет 1 – 15 20-910

Читайте далее отдельный обзор: Норма лимфоцитов в крови у ребенка по возрасту в таблице

Отклонение от референсных показателей

Пациенты задаются вопросом: что означает, если лимфоциты в крови выше или ниже нормы? Следует отметить, что незначительное отклонение от референсных значений может быть результатом неправильной подготовки к анализу. В этом случае рекомендуется повторить исследование.

Присутствие большого количества атипичных лимфоцитов в анализе крови у ребёнка или взрослого указывает на патологический процесс. Важно определить то, какой именно тип из общей субпопуляции белых кровяных телец отклоняется от нормы.

Т-лимфоциты

Повышение Т-лимфоцитов (CD3+CD19-) наблюдается на фоне лейкоза, острой или хронической стадии инфекционного процесса, гормонального сбоя, длительного употребления лекарств и биологических добавок, а также при высоких физических нагрузках и беременности. В случае снижения критерия выносится предположение о поражении печени (цирроз, рак), аутоиммунных патологиях, иммунодефицитах или угнетении иммунитета лекарственными препаратами.

T-хелперы

Концентрация T-хелперов (CD3+CD4+CD45+) значительно повышается при интоксикации бериллием, ряде аутоиммунных заболеваний и некоторых инфекционных заражениях. Снижение величины является основным лабораторным признаком вторичного иммунодефицита, а также может наблюдаться при приёме стероидных препаратов и циррозе печени.

Повышение T-цитотоксических лимфоцитов

Причинами повышения T-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+CD45+) являются:

  • аллергическая реакция немедленного типа;
  • аутоиммунные патологии;
  • лимфоз;
  • вирусная инфекция.

Читайте далее: О чем говорит повышение лимфоцитов в крови у взрослого, и что делать?

Отклонение от нормы в меньшую сторону указывает на угнетение естественного иммунитета человека.

B-лимфоциты (CD19+CD3—) увеличиваются при сильном эмоциональном или физическом стрессе, лимфоме, аутоиммунных болезнях, а также в случае длительной интоксикации парами формальдегида. Реактивные лимфоциты В уменьшаются в случае их миграции в очаг воспалительного процесса.

Два типа натуральных киллеров: CD3—CD56+CD45+ и CD3—CD16+CD45+ достигают максимальных значений в фазе регенерации организма человека после гепатита и беременности, а также при некоторых онко-, аутоиммунных и печёночных патологиях. Их снижению способствует злоупотребление табакокурением и стероидными препаратами, а также некоторые инфекции.

И еще: Все о пониженных значениях лимфоцитов в анализе крови

Как подготовиться к анализу?

Для того чтобы получить максимально достоверные результаты необходимо строго следовать правилам подготовки перед сдачей биоматериала, поскольку лимфоциты в крови чувствительны ко многим внешним факторам (стресс, лекарства). Биоматериал для исследования – сыворотка венозной крови из локтевой вены.

За 1 сутки до сдачи крови пациенту следует отказаться от употребления алкоголя и любых спиртосодержащих продуктов, а также от всех медикаментозных препаратов. В случае невозможности отмены жизненно важных средств нужно сообщить об их приёме мед. персоналу. Кроме того, исключается физическая и эмоциональная нагрузка, что может вызвать повышение исследуемых критериев.

Кровь сдаётся натощак, минимальный интервал между процедурой взятия биоматериала и последним приёмом пищи – 12 часов. За полчаса нужно отказаться от курения.

Выводы

Подводя итог, следует выделить важные аспекты:

  • исследование является основным компонентом при диагностике поражений иммунной системы;
  • нормальные значения подбираются в соответствии с возрастом обследуемого пациента;
  • точность полученных данных зависит не только от правильной реализации методики анализа, но и соблюдения всех правил подготовки самого человека;
  • недопустимо отдельное применение иммунограммы для постановки окончательного диагноза, поскольку отклонение от нормы различных субпопуляций клеток иммунной системы может указывать на ряд схожих патологий. В этом случае назначается дополнительное обследование, включающее набор тестов: С3 и С4 компонента комплемента, циркулирующие иммунные комплексы, а также суммарные иммуноглобулины классов А, G и M.

Читайте далее: Что означает появление белка в моче; нормы и причины повышения

  • About
  • Latest Posts

Юлия Мартынович (Пешкова)

Дипломированный специалист, в 2014 году закончила с отличием ФГБОУ ВО Оренбургский госудаственный университет по специальности «микробиолог». Выпускник аспирантуры ФГБОУ ВО Оренбургский ГАУ.
В 2015г. в Институте клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения РАН прошла повышение квалификации по дополнительной профессиональной программе «Бактериология».
Лауреат всероссийского конкурса на лучшую научную работу в номинации «Биологические науки» 2017 года.
Автор многих научных публикаций.

Исследование основных субпопуляций лимфоцитов – профильный анализ крови, при котором определяется уровень нескольких видов лимфоцитов, различающихся по функциям и стадиям развития. Комплекс включает в себя исследование Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-цитотоксических лимфоцитов, B-лимфоцитов, EK-клеток, T-EK-клеток, расчет иммунорегуляторного индекса, определение общего количества лимфоцитов. Анализ находит применение в иммунологии, инфекционистике, онкологии, хирургии. Показан при рецидивирующих и хронических инфекциях, состояниях иммунодефицита, аутоиммунных, аллергических и онкологических заболеваниях, при подготовке к операциям. Материалом для исследования является цельная кровь. Анализ выполняется методом проточной цитофлуориметрии. Для каждой субпопуляции лимфоцитов существуют определенные значения нормы. Подготовка результатов занимает около 2 дней.

Исследование основных субпопуляций лимфоцитов – профильный анализ крови, при котором определяется уровень нескольких видов лимфоцитов, различающихся по функциям и стадиям развития. Комплекс включает в себя исследование Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-цитотоксических лимфоцитов, B-лимфоцитов, EK-клеток, T-EK-клеток, расчет иммунорегуляторного индекса, определение общего количества лимфоцитов. Анализ находит применение в иммунологии, инфекционистике, онкологии, хирургии. Показан при рецидивирующих и хронических инфекциях, состояниях иммунодефицита, аутоиммунных, аллергических и онкологических заболеваниях, при подготовке к операциям. Материалом для исследования является цельная кровь. Анализ выполняется методом проточной цитофлуориметрии. Для каждой субпопуляции лимфоцитов существуют определенные значения нормы. Подготовка результатов занимает около 2 дней.

Основные субпопуляции лимфоцитов – группы клеток иммунной системы, различающиеся по функциям, происхождению, стадиям развития и поверхностным антигенным маркерам. Принадлежность к той или иной субпопуляции определяет роль лимфоцитов в формировании иммунного ответа, их расположение в лимфоидных органах, особенности циркуляции в кровеносной и лимфатической системе. Фенотипирование лимфоцитов необходимо для установления природы инфекционного агента, оценки состояния пациента, определения активности иммунной системы и необходимости медикаментозной терапии, контроля течения заболевания и составления прогноза.

При исследовании основных субпопуляций лимфоцитов выделяют несколько их групп. Т-лимфоциты созревают в тимусе, участвуют в клеточном иммунном ответе, регулируют функции B-лимфоцитов, ответственных за выработку антител. Т-хелперы распознают антигены и регулируют иммунный ответ через выработку цитокинов – сигнальных, информационных пептидов. Т-цитотоксические лимфоциты идентифицируют фрагмент антигена на поверхности клетки-мишени, направляют гранулы в область контакта с инфекционным агентом и запускают лизис поврежденной клетки. B-лимфоциты при контакте с антигеном делятся и дифференцируются в плазматические клетки, синтезирующие антитела. EK-клетки обладают естественной цитотоксической активностью, обеспечивают лизис поврежденных клеток-мишеней. T-EK-клетки имеют признаки Т-лимфоцитов, являются естественными неиммунными киллерами.

При выполнении комплексного исследования основных субпопуляций лимфоцитов определяется также общее количество лимфоцитов (абсолютное значение) и рассчитывается иммунорегуляторный индекс – соотношение Т-хелперов и Т-цитотоксических лимфоцитов. Для проведения анализа используется метод проточной цитофлуориметрии и иммуноферментный метод, забор крови производится из вены. Полученные результаты применяются в иммунологии, инфекционистике, ревматологии, онкологии, хирургии.

Показания

Исследование основных субпопуляций лимфоцитов используется для диагностики первичного и вторичного иммунодефицита. Вне зависимости от его типа основным и нередко единственным проявлением становятся инфекции затяжного или рецидивирующего характера. Чаще всего у пациентов определяется бактериальное поражение дыхательных путей с характерными симптомами – болью в горле, кашлем, насморком. Типичны инфекции желудочно-кишечного тракта, сопровождающиеся диареей, рвотой, синдромом мальабсорбции. Кроме этого, иммунодефицит может проявляться оппортунистическими инфекциями – цитомегаловирусной инфекцией, кандидозом, пародонтитом, конъюнктивитом, экземой, бородавками и папилломами. В более редких случаях нарушения иммунной системы сопровождаются гемолитическими патологиями (анемией, лейкопенией, тромбоцитопенией), неврологическими симптомами (судорожными припадками), онкологическими и аутоиммунными заболеваниями. Анализ на определение основных субпопуляций лимфоцитов в крови назначается пациентам при подготовке к операциям, до и после трансплантации органов, при послеоперационных осложнениях, а также для контроля лечения иммуномодуляторами и цитостатиками.

Геморрой в 79% случаев убивает пациента

При интерпретации результатов всегда учитывается, что соотношение основных субпопуляций лимфоцитов может не отражать их реального участия в иммунологических процессах. Поэтому данное исследование дополняется анализами на иммуноглобулины, ЦИК, компоненты системы комплемента. Преимуществом фенотипирования лимфоцитов является то, что анализ позволяет более точно судить о протекании основных реакций защитной системы в отличие от теста на общее количество лимфоцитов.

Подготовка к анализу и забор материала

Основные субпопуляции лимфоцитов исследуются в венозной крови. Процедуру забора биоматериала рекомендуется выполнять с утра, натощак. За день до исследования нужно воздержаться от употребления алкоголя, а также от тяжелых физических нагрузок. За три часа до процедуры следует отказаться от курения, избегать эмоционального напряжения. Кровь берется методом венепункции, хранится и транспортируется в пробирках с антикоагулянтом.

Исследование основных субпопуляций лимфоцитов выполняется методом проточной цитофлуориметрии, иногда – иммуноферментным методом. Проточная цитофлуориметрия основана на идентификации различных видов лимфоцитов с помощью лазера, то есть на основе характеристик светорассеяния и интенсивности луча. Иммуноферментный метод основан на том, что на поверхности лимфоцитов присутствуют различные антигены, уникальные для определенных популяций. Их обнаружение выполняется с помощью меченных ферментом моноклональных антител, количество определяется на основе изменения окраски (оптической плотности) образца. Подготовка результатов анализа занимает до 2-3 дней.

Нормальные значения

Значения нормы для анализа на основные субпопуляции лимфоцитов в крови зависят от возраста, определяются в абсолютном значении и в % от общего количества лимфоцитов:

  • Т-лимфоциты: для детей до 16 лет – 1400-6450*106/л (45-81%), для взрослых – 800-2400*106/л (60-89%);
  • Т-хелперы: для детей до 16 лет – 700-5116*106/л (31-64%), для взрослых – 540-1400*106/л (31-61%);
  • Т-цитотоксические лимфоциты: для детей до 16 лет – 600-2490*106/л (16-38%); для взрослых – 210-1200*106/л (14-36%);
  • B-лимфоциты: для детей до 16 лет – 300-1500*106/л (12-31%), для взрослых – 100-480*106/л (5-19%);
  • EK-клетки: для детей до 16 лет – 100-1330*106/л (2-27%), для взрослых – 78-470*106/л (4-26%);
  • EKT-клетки: для детей до 16 лет – 0-10%; для взрослых – 1-13% (абсолютное значение не определяется);
  • иммунорегуляторный индекс: от 1 до 3,5.

Для детей значения нормы могут быть определены более точно согласно возрасту. Физиологическое изменение показателей анализа возможно при физической нагрузке, эмоциональном стрессе, охлаждении, после приема пищи.

Повышение уровня лимфоцитов

Причиной повышения уровней основных субпопуляций лимфоцитов в крови является воспалительный процесс. Количество Т-лимфоцитов увеличивается при иммунном воспалении; количество Т-хелперов – при острых инфекционных, аллергических и аутоиммунных заболеваниях; количество Т-цитотоксических лимфоцитов – при острых внутриклеточных инфекциях, онкологических патологиях; количество B-лимфоцитов – при острых и хронических инфекциях, аллергиях и аутоиммунных заболеваниях; количество EK-клеток – при острых инфекциях с избытком бактериального или вирусного антигена, при онкопроцессах; количество TEK-клеток – при хронических инфекциях, длительной персистенции антигена.

Снижение уровня лимфоцитов

Причиной снижения уровня основных субпопуляций лимфоцитов чаще всего является гипореактивность – преобладание тормозных процессов в организме на различных уровнях. Концентрация Т-лимфоцитов снижается при иммунологическом параличе – снижении или полном отсутствии иммунного ответа. Сниженный показатель Т-хелперов определяется при вторичных иммунодефицитных состояниях. Количество Т-цитотоксических лимфоцитов уменьшается при аутоиммунных и аллергических заболеваниях; количество B-лимфоцитов – при перераспределении очагов воспаления; количество EK-клеток – при высоком уровне Т-лимфоцитов. Сниженный уровень T-EK-клеток не имеет диагностического значения.

Лечение отклонений от нормы

Определение основных субпопуляций лимфоцитов в крови позволяет более глубоко исследовать состояние иммунодефицита – определить тип инфекционного агента, особенности течения заболевания, необходимость применения иммуномодуляторов. Для интерпретации результатов анализа необходимо обратиться к иммунологу, инфекционисту или другому врачу, направившему на исследование. Чтобы избежать повышения показателей из-за влияния физиологических факторов, нужно соблюсти все правила подготовки к процедуре сдачи крови.

Субпопуляции Т-лимфоцитов и их функции

  1. Foreign Office – структура, функции…..
  2. III. Вегетативные функции НС.
  3. III. Функции полномочного представителя
  4. SQL-функции
  5. Автоматизированное рабочее место. Его состав, функции, аппаратное и программное обеспечение.
  6. Анатомия ствола головного мозга (структуры и функции).
  7. Анатомия, гистология, функции наружной оболочки глаза.
  8. Антигензависимая дифференцировка Т-лимфоцитов
  9. Антигеннезависимая дифференцировка Т-лимфоцитов
  10. Аритмии, обусловленные нарушением функции проводимости

Различают следующие основные субпопуляции Т-лимфоцитов: CD4+ Т-хелперы, CD4+ регуляторные Т-лимфоциты и CD8+ цитотоксические Т-лимфоциты.

CD4+Т-хелперы

Основным маркером субпопуляции Т-хелперов является дифференцировочный антиген CD4. Наивные CD4+ Т-лимфоциты, мигрирующие из тимуса, составляют субпопуляцию так называемых нулевых хелперов – Тх0 клеток. Эти клетки в литературе называли ранее антигенреактивными клетками, или Т-индукторами.

Именно Тх0 подвергаются примированию при первичном распознавании антигенов. Из этих клеток в зависимости от ситуации образуются зрелые эффекторные Тх1 и/или Тх2, непосредственно участвующие в осуществлении адаптивного иммунного ответа против антигенов, вызвавших их дифференцировку.

Тх0, Тх1 и Тх2 не отличаются по основному набору фенотипических маркеров: все они содержат на своей поверхности белки CD2, CD3, ТКР и маркер хелперной субпопуляции CD4 (в последнее время, однако, показано, что значительная часть Тх2, в отличие от Тх1, экспрессируют также антиген CD30). Однако лимфоциты, принадлежащие к разным хелперным субпопуляциям, синтезируют разные наборы цитокинов и поэтому участвуют в развитии различных типов адаптивного иммунного ответа.

Тх0 на стадии примирования активируются и выделяют ИЛ-2 и небольшое количество ИЛ-4. ИЛ-2 вызывает аутокринную стимуляцию размножения Тх0 данного клона. В зависимости от целого ряда факторов индуцируется дифференцировка Тх0 в Тх1 или в Тх2. Факторы, определяющие направление этой дифференцировки, пока недостаточно изучены.

Показано, однако, что формирование того или иного типа хелперов зависит от природы антигена (бактерии, вирусы, чужеродные белки и т.п.), что, в свою очередь, во многом определяет характер активации АПК через рецепторы врожденного иммунитета и набор синтезируемых ими цитокинов; от физико-химических характеристик антигена (дисперсность, растворимость и др.); от концентрации, способа попадания в организм, дозы антигена, а также от генетически детерминированной отвечаемости организма на этот антиген.

Важную роль играет микроокружение: поверхностные молекулы клеток стромы органа и гуморальные факторы, синтезируемые этими клетками.

Так, микроокружение лимфатических узлов в большей мере способствует образованию Тх1, а микроокружение слизистых оболочек (кишечник, дыхательные пути) – дифференцировке Тх2.

Показано также, что очень важную роль в выборе направления дифференцировки играют тип и особенности функционирования АПК, в первую очередь из-за спектра синтезируемых ими цитокинов (рис. 30).

Активированные через Толл-подобные рецепторы МФ и ДК, презентирующие антиген, начинают синтезировать ИЛ-1 и ИЛ-12. Некоторые инфекционные агенты, особенно внутриклеточные бактерии и вирусы, индуцируют в макрофагах и дендритных клетках лимфоузлов синтез значительных количеств ИЛ-12. ИЛ-12 вызывает активацию натуральных киллеров (NK-клеток), которые выделяют IFN-γ. Под влиянием ИЛ-12 и IFN-γ Тх0 активируются и дифференцируются в Тх1. В то же время ИЛ-12 не только стимулирует образование Тх1, но и тормозит образование Тх2.IFN- γ, синтезируемый NK-клетками, также тормозит образование Тх2.

Рисунок 30. Антигензависимая дифференцировка Т-хелперов

Т-хелперы-2 (Тх2)образуются преимущественно в микроокружении слизистых оболочек из примированных Тх0, этому способствует представление антигена ДК ивыделение ими в результате стимуляции через определенные Толл-подобные рецепторы ИЛ-6.

Главным цитокином, который стимулирует образование Тх2, является ИЛ-4. Небольшие количества ИЛ-4 синтезируют Тх0. Источником ИЛ-4 могут также быть базофилы и тучные клетки слизистых. Способствуя образованию Тх2, ИЛ-4 одновременно тормозит дифференцировку Тх1.

Показано также, что образованию Тх2 способствует присутствие трансформирующего фактора роста β (TGF-β), который образуется клетками эпителия слизистых оболочек. Для активации Тх2 также необходимо стимулирующее воздействие ИЛ-1 и ИЛ-6.

Тх1 и Тх2 синтезируют определенные наборы цитокинов, спектр которых отчасти перекрывается, однако некоторые цитокины характерны только для той или иной субпопуляции (Рис. 3).

Тх1 продолжают синтезировать ИЛ-2 и начинают синтезIFN-γ, ИЛ-3 и ИЛ-8, стимулирующего хемотаксис. Эти клетки синтезируют также гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (ГМ-КСФ), опухоленекротические факторы α- и β- (TNF-α и TNF-β), фактор, угнетающий миграцию лейкоцитов (ФУМ), макрофагвооружающий фактор (MAF), а также факторы, стимулирующие пролиферацию клеток соединительной ткани и продукцию коллагена фибробластами. Эти лимфокины способствуют прежде всего развитию клеточного типа адаптивного иммунного ответа.

Тх2, в отличие от Тх1, не синтезируют ИЛ-2 и IFN-γ, зато они синтезируют в больших количествах ИЛ-4. Тх2 синтезируют также ИЛ-3, ИЛ-5, 8, 10, 13 и ГМ-КСФ. Таким образом, ИЛ-3,8 и ГМ-КСФ являются общими цитокинами для Тх1 и Тх2.